實驗室的環(huán)境與操作結(jié)果及安全性有著不可分割的密切關(guān)系，要求工作環(huán)境清潔、空氣清 新、干燥燥和無煙塵，今天我們就以細胞培養(yǎng)實驗為例，與您論實驗室環(huán)境要求達標(biāo)的重要性 。
一、常用設(shè)備
1.超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側(cè)流式，直流式和外流式三大類。
2.無菌操作間：一般由更衣間，緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺 及二氧化碳培養(yǎng)箱，離心機，倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱，冷藏器及消毒好的無 菌物品等。
3.操作間：普通培養(yǎng)箱，離心機，水浴鍋，定時鐘，普通天平及日常分析處理物。
4.洗刷消毒間：烤箱，消毒鍋，蒸餾水處理器及酸缸等。
5.分析間：顯微鏡，計算機及打印機等。
二、合適的氣體環(huán)境
氣體是哺乳動物細胞培養(yǎng)生存必需條件之一，所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。氧氣 參與三羧酸循環(huán)，產(chǎn)生供給細胞生長增殖的能量和合成細胞生長所需用的各種成分。開放 培養(yǎng)時一般把細胞置于95%空氣加5%二氧化碳混合氣體環(huán)境中。
二氧化碳既是細胞代謝產(chǎn)物，也是細胞生長繁殖所需成分，它在細胞培養(yǎng)中的主要作 用在于維持培養(yǎng)基的pH值。大多數(shù)細胞的適宜pH為7.2-7.4，偏離這一范圍對細胞培養(yǎng)將產(chǎn) 生有害的影響。但細胞耐酸性比耐堿性大一些，在偏酸環(huán)境中更利于細胞生長。但有一些 細胞也喜歡偏堿環(huán)境中生長，如成纖維細胞pH是7.4-7.6.每種細胞都有其zui適pH值 。
三、細胞培養(yǎng)溫度
維持培養(yǎng)細胞旺盛生長，必須有恒定而適宜的溫度。不同種類的細胞對培養(yǎng)溫度要求 也不同，人體細胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)溫度為36.5℃±0.5℃，偏離這一溫度范圍，細胞的正常代謝 會受到影響，甚至死亡。培養(yǎng)細胞對低溫的耐受力較對高溫強，溫度上升不超過39℃時， 細胞代謝與溫度成正比；人體細胞在39-40℃1小時，即能受到一定損傷，但仍有可能恢復(fù) ；在40-41℃1小時，細胞會普遍受到損傷，僅小半數(shù)有可能恢復(fù)；41-42℃1小時，細胞受 到嚴(yán)重?fù)p傷，大部分細胞死亡，個別細胞仍有恢復(fù)可能；當(dāng)溫度在43℃以上1小時，細胞全 部死亡。相反，溫度不低于0℃時，對細胞代謝雖有影響，但并無傷害作用；把細胞放入 25-35℃時，細胞仍能生存和生長，但速度減慢；放在4℃數(shù)小時后，再回到37℃培養(yǎng)，細 胞仍能繼續(xù)生長。細胞代謝隨溫度降低而減慢。當(dāng)溫度降至冰點以下時，細胞可因胞質(zhì)結(jié) 冰受損而死亡。但是，如果向培養(yǎng)液中加入一定量的冷凍保護劑(二甲亞砜或甘油)，可在 深低溫下如-80℃或-196℃(液氮)長期保存。
